Kaip DNR profiliavimo Works

Pirmasis metodas sukurti DNR buvo RFLP arba apribojimas fragmentas ilgis polimorfizmas. RFLP nėra naudojama kaip dažnai šiandien, nes jis reikalauja daug mėginį DNR - net 25 plaukais arba nikelio dydžio dėmė kūno skysčio - ir gali užtrukti mėnesį užbaigti [šaltinį: Baden]. Taip pat reikia išnagrinėti keletą skirsnių DNR grandineje rasti variantų, kurie užima daug laiko ir palieka daugiau erdvės žmogaus klaida. Kai kurios iš žingsnių RFLP analizės yra taip pat naudojamas kitų tipų DNR profiliavimo. Dėl RFIP, žingsniai yra: Rīga,

1. Atskiros balta ir raudona kraujo ląstelės su centrifuga.
   
2. ekstraktas DNR branduoliai iš baltųjų kraujo kūnelių. Tai daroma maudymosi ląsteles karštame vandenyje, tada pridedant druskos, ir pradėti mišinį atgal į centrifugos [šaltinis: University of Arizona].
   
3. Iškirpti DNR vijos į fragmentus, naudojant restrikcijos fermentą.
   
4. Vieta fragmentai į vieną pusę iš agarozės gelyje lovoje su elektrodų jį. Agarozės gelyje yra pagamintas iš agaras nuo jūros dumblių tipo, kuri virsta želatinos, kai ištirpinta verdantį vandenį.
   
5. Naudoti elektros srovę rūšiuoti DNR segmentus pagal ilgį. Šis procesas yra vadinamas agarozės gelyje. Elektroforezės reiškia juda neigiamai įkrautą molekules per gelį su elektros energijos procese. Trumpesnis segmentai perkelti toliau nuo jų pradinę vietą, o ilgesni tie likti arčiau. Segmentai suderinti lygiagrečiomis eilėmis.
   
6. Naudokite nitroceliulioze ar nailono lapą ištrink DNR. Lapas nudažomi todėl skirtingų ilgių DNR juostų yra matomi plika akimi. Apdorojant su radiacijos vele, autoradiograph yra sukurta. Tai yra ant rentgeno plėvelės, paliktas slopinimo modelis spinduliavimo, vaizdas. Autoradiograph, su skiriamaisiais tamsių spalvos lygiagrečių juostų, yra DNR.
   

   PGR (polimerazės grandininė reakcija) analizė paprastai yra pirmasis žingsnis DNR profilio sukūrimo šiandien. PGR gali atkartoti nedidelį kiekį DNR sukurti didesnę mėginį analizei. Jis tai daro naudojant pasikartojantį procesą, kuris trunka apie penkias minutes. Pirma, termiškai stabili DNR polimerazė - specialus fermentas, kuris rišasi su DNR, ir leidžia jį atkartoti - yra pridėta. Toliau, DNR mėginys kaitinamas jį į 200 laipsnių F (93 laipsnių C), siekiant atskirti sriegius. Tada mėginys yra atšaldomas ir pašildomas. ŠILDYMAS padvigubina kopijų skaičių. Po to, kai šis procesas yra kartojamas apie 30 kartų,

   Page [1] [2] [3] [4] [5] [6] [7]